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犬細小病毒2c亞型毒株的分離與鑒定

鄧永; 孔冬妮; 侯力丹; 毛婭卿; 王嘉 中國獸醫藥品監察所; 北京100081
  • 犬細小病毒
  • 分離與鑒定
  • 免疫過氧化物酶單層細胞染色法

摘要:采集一疑似犬細小病毒(CPV)患犬的糞便,用納米PCR方法對病料進行CPV檢測,并應用貓腎細胞F81進行病毒分離培養,采用免疫過氧化物酶單層細胞染色法(IPMA)檢測病毒在F81細胞中的增殖動態。利用PCR擴增分離病毒的VP2基因,測序結果用DNAMAN軟件對獲得的VP2基因序列進行拼接,并與NCBI上已經公布的犬細小病毒的全基因組序列以及相關蛋白的核酸序列進行比較,確定其所分離的病毒株型并推導氨基酸序列。結果表明,納米PCR檢測結果為CPV核酸陽性,病料接種到F81細胞培養后出現明顯細胞病變(CPE),血清學鑒定為CPV抗原陽性,序列測定分析表明,該毒株VP2基因開放閱讀框(ORF)為1755 bp。進化分析顯示,該毒株屬于CPV-2c型,并命名為CPV-2c-Guangxi23。

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