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摘要：芥子氣可以與血紅蛋白的組氨酸側鏈發生反應,生成芥子氣暴露染毒的生物標志物。本研究建立了定性、定量檢測痕量芥子氣暴露染毒人血紅蛋白加合物的方法。采用2-氯乙基乙基硫醚(2-CEES)染毒的血紅蛋白溶液作為內標,用鏈霉蛋白酶對芥子氣-珠蛋白加合物進行酶解,經PPL柱固相萃取純化以及芐氧羰基氯(Cbz-Cl)衍生,使用超高效液相色譜-串聯質譜(UHPLC-MS/MS)進行分析檢測。經過優化實驗條件,最終選擇鏈霉蛋白酶的酶解溫度55℃,酶解時間10.0 h,使用3.0 mL 5%甲醇水溶液淋洗,1.0 mL 50%甲醇水溶液洗脫,Cbz-Cl衍生時間30 min。結果表明,在10.0~1 000μg/L線性范圍內,線性關系良好(R~2>0.997),準確度為89.8%~113%,精密度(RSD)不高于12.4%,檢出限(LOD)為10.0μg/L(S/N>5)。該方法采用2對離子對進行確證,有助于痕量芥子氣暴露染毒的溯源性分析,與傳統酸解法相比,該方法樣品處理時間短,反應條件溫和、操作簡單,且靈敏度可提高約150倍。