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人乳頭瘤病毒2(HPV2)E2蛋白不同功能區(qū)突變對(duì)轉(zhuǎn)錄抑制作用影響的研究

高晨; 雷艷君; 姜慧英; 石琦; 田嬋; 韓俊; 董小平 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所; 傳染病預(yù)防控制國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 北京100052
  • 乳頭狀病病毒
  • 病毒蛋白質(zhì)類(lèi)
  • 突變

摘要:目的 研究HPV2變異株上E2蛋白不同功能區(qū)域的點(diǎn)突變對(duì)其轉(zhuǎn)錄作用的影響.方法 根據(jù)HPV2突變株E2上的突變點(diǎn)設(shè)計(jì)引物,采用延伸法構(gòu)建不同的E2突變體,并插入到真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1中.表達(dá)不同突變體E2的pcDNA3.1-E2與帶有HPV原毒株LCR的CAT報(bào)道基因載體進(jìn)行共轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞.通過(guò)檢測(cè)CAT的表達(dá)量對(duì)不同E2突變體的轉(zhuǎn)錄抑制作用進(jìn)行評(píng)估.結(jié)果 與全長(zhǎng)的原毒株E2相比較,去除N端及C端功能區(qū)的E2蛋白均降低了E2蛋白對(duì)啟動(dòng)子活性的抑制作用.位于E2蛋白轉(zhuǎn)錄激活區(qū)(nt 3037),鉸鏈區(qū)(nt 3387)及DNA結(jié)合區(qū)(nt 3697)的點(diǎn)突變明顯影響了其轉(zhuǎn)錄抑制功能.結(jié)論 HPV2 E2蛋白的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能與其轉(zhuǎn)錄激活區(qū)以及DNA結(jié)合區(qū)密切相關(guān).HPV2突變株上的不同的E2的單個(gè)突變點(diǎn)能夠明顯降低E2蛋白對(duì)啟動(dòng)子活性的抑制作用.

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