首頁 > 期刊 > 自然科學(xué)與工程技術(shù) > 醫(yī)藥衛(wèi)生科技 > 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué) > 中華實驗和臨床病毒學(xué) > 人源抗EV71病毒基因工程抗體的研究 【正文】
摘要:目的 研制人源抗EV71病毒基因工程抗體.方法 采集多個患兒外周血淋巴細胞,構(gòu)建人源抗EV71單鏈(scFv)噬菌體抗體基因文庫.用純化的EV71 VPI蛋白對抗體庫進行篩選,將篩出抗體的輕鏈和重鏈通過序列測定確定抗體輕重鏈型別后分別克隆入全抗體表達載體pAC-LCH3R后轉(zhuǎn)染昆蟲Sf9細胞,利用桿狀病毒/昆蟲細胞系統(tǒng)實現(xiàn)全抗體的分泌型表達.結(jié)果 成功地獲得了1株抗EV71病毒VPI蛋白的人源單克隆抗體,利用ELISA、IFA對所獲人源單克隆抗體的功能特性進行鑒定,表達成分泌型IgG全抗體在體外與A型及C4亞型EV71病毒的中和反應(yīng)結(jié)果 顯示為陰性.結(jié)論 從免疫庫中獲得了1株人源非中和單抗,為EV71病毒引起的手足口病的鑒別診斷奠定了基礎(chǔ).
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